一种蛋白酶缺陷型大体积工程菌及其构建方法与应用

本发明涉及一种生产重组蛋白的方法，其中通过敲低或者敲除胞内蛋白水解酶基因(包括但不限于ATP依赖的丝氨酸蛋白酶<I>lon、</I>丝氨酸内肽酶<I>htrA</I>或它们的组合)，使细胞具有更稳定的异源蛋白表达环境，有利于易被宿主降解的难表达或低表达重组蛋白的胞内合成。进一步通过调控形态相关基因(包括但不限于微生物骨架蛋白基因<I>mreBCD</I>、细胞分裂环合成基因<I>ftsABEIQWXYZ</I>、细胞分裂遏制蛋白基因<I>sulA</I>、细胞分裂环定位基因<I>minCDE</I>)，产生更大的细胞形态和体积，由此能够容纳更多胞内蛋白，从而提高重组蛋白(如脂肪酶、乳铁蛋白LTF、α‑乳白蛋白α‑LA及甜蛋白(如Monellin))及单细胞蛋白的生产。