在审

一种植物多基因编辑载体编辑效率的检测方法

牛丽芳、李世豪、夏秀芝、林浩、王召明、苑峰、刘亚玲
中国农业科学院生物技术研究所
牛丽芳机构 暂无
技术领域 暂无
李世豪机构 暂无
技术领域 暂无
夏秀芝机构 暂无
技术领域 暂无
林浩机构 暂无
技术领域 暂无
王召明机构 暂无
技术领域 暂无
苑峰机构 暂无
技术领域 暂无
刘亚玲机构 暂无
技术领域 暂无

摘要

本发明公开了一种植物多基因编辑载体编辑效率的检测方法。包括:(1)根据待编辑的植物的多个靶基因设计sgRNA并构建植物多基因编辑载体;(2)将构建的植物多基因编辑载体转化植物毛状根;(3)鉴定阳性转基因植物毛状根;(4)检测植物多基因编辑载体编辑效率;其中转化包括:(a)制备农杆菌菌膜;(b)在1/2CO液体培养基中将萌发的植物种子的根尖划伤产生伤口;(c)将种子的伤口在农杆菌菌膜上划动后置于1/2CO固体培养基上进行培养;(d)待根尖伤口处膨大转入1/2筛选培养基继续培养得到转基因植物毛状根。通过该检测方法,能够对gRNA进行更有效的筛选,进而实现高效的基因编辑,大大缩短实验周期。

暂无引用专利