一种云南松组培苗的繁殖方法

1.一种云南松组培苗的繁殖方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）种子催芽和消毒：选取云南松的成熟健康种子，首先利用初始温度为50～55°C温水持续浸泡，直到自然冷却，在浸泡24h后更换冷水1次，催芽累计持续48h，然后消毒获得无菌种子备用；（2）无菌萌发：无菌条件下，将步骤（1）获得的无菌种子接种于无菌培养瓶中萌发生长，获得无菌实生苗；（3）丛生芽诱导：无菌条件下，将步骤（2）获得的无菌实生苗的顶芽接种于丛生芽诱导培养基上，进行丛生芽诱导；所述丛生芽诱导培养基的配方为：1/2MS+1.0mg/L 6-BA+0.15mg/L IBA+1.5 mg/L KT+4.4 g/L琼脂+30 g/L 蔗糖，pH 5.6；（4）伸长生长：将诱导出的丛生芽转接至伸长生长培养基上进行生长；所述伸长生长培养基为1/4 MS+0.2%活性炭+30g/L 蔗糖，pH 5.6，在该培养基上培养45～60天后，将丛生芽取出切成单芽，转移到相同培养基上继续培养30～45天，至芽的高度为2.0～3.0cm；（5）生根培养：选择高度为2.0～3.0 cm的单芽，然后置于含有生长素的无菌溶液中浸泡20～30 min，结束后置于无菌纸上吸干水分，最后接种于生根培养基上；所述含有生长素的无菌溶液中含0.15 mg/L IBA+0.15 mg/L NAA；所述生根培养基配方为：1/4 MS+0.2%活性炭+20 g/L 蔗糖，pH 5.6；（6）移栽炼苗：将生根苗在室内自然光下，闭瓶炼苗8～10 d，取出生根苗并用清水洗净基部培养基，移栽至田园土中。 2.根据权利要求1所述的繁殖方法，其特征在于，步骤（3）中，丛生芽诱导后将诱导出的丛生芽进行继代扩繁，所述继代扩繁使用的培养基为在丛生芽诱导培养基中添加0.1%活性炭制备而成。 3.根据权利要求2所述的繁殖方法，其特征在于，所述无菌萌发、丛生芽诱导、丛生芽进行继代扩繁、伸长生长和生根培养，培养条件均为：温度21±2℃，光照时间为14～16 h/d，光照强度为2000～2500 Lx。 4.根据权利要求1所述的繁殖方法，其特征在于，步骤（1）中，消毒方法为：使用0.1%的HgCl 2 浸泡消毒1.5～2 h后，再用无菌水浸泡20～30 min，挑出种子置于无菌滤纸上吸干水分，获得无菌种子。 5.根据权利要求1所述的繁殖方法，其特征在于，步骤（6）中，所述移栽炼苗过程中的环境条件为：温度为20～30°C，空气湿度保持在80%以上。