一种重组微生物及其在生产聚羟基脂肪酸酯中的应用

1.一种培养微生物的方法，其特征在于，所述的微生物生产PHA，所述的方法提高碳源转化率或提高PHA产量；所述方法包括使用培养基，所述的培养基包括碳源、氮源和无机盐，所述的氮源包括氨基酸或氨基酸盐，所述的氨基酸为谷氨酸，所述的氨基酸盐为谷氨酸盐；所述的氨基酸的加入方式包括直接加入谷氨酸，或者，加入包含谷氨酸的毛发水解物或酪蛋白水解物中的一种或两种；所述的微生物的谷氨酸合成相关蛋白失活；所述的谷氨酸合成相关蛋白为谷氨酰胺合成酶GlnA或谷氨酰胺合成酶GlnN；所述的微生物选自盐单胞菌属( Halomonas )、恶臭假单胞菌( Pseudomonas putida )、罗氏真养杆菌( Ralstonia eutropha )、大肠杆菌( Escherichia coli )或嗜水气单胞菌( Aeromonas hydrophila )中的一种或两种以上；所述的大肠杆菌( Escherichia coli )表达外源的聚羟基脂肪酸酯合成相关蛋白。 2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的毛发水解物包括羊毛水解物。 3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的氨基酸盐包含氨基酸的钾盐、钠盐、钙盐、镁盐或锌盐中的一种或两种以上。 4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述培养基中氨基酸或氨基酸盐的浓度为0.01-2mol/L。 5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的培养基中碳源的浓度为1-300g/L。 6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的碳源选自葡萄糖、葡萄糖酸盐、葡萄糖酸酯、蔗糖、果糖、月桂酸、乙酸、丙酸、丁酸、棕榈油或油酸中的一种或两种以上。 7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的培养基中无机盐的浓度为2.5-100g/L。 8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的盐单胞菌属( Halomonas )包括 Halomonas bluephagenesis TD01、 Halomonas aydingkolgenesis M1或 Halomonas campaniensis LS21。 9.一种重组微生物，其特征在于，所述的重组微生物为盐单胞菌属( Halomonas )，或者，嗜水气单胞菌( Aeromonas hydrophila )，所述的重组微生物生产PHA；所述的重组微生物的谷氨酸合成相关蛋白失活，所述的谷氨酸合成相关蛋白为谷氨酰胺合成酶GlnA或谷氨酰胺合成酶GlnN。 10.根据权利要求9所述的重组微生物，其特征在于，所述的盐单胞菌属( Halomonas )包括 Halomonas bluephagenesis TD01、 Halomonas campaniensis LS21或 Halomonas aydingkolgenesis M1。 11.根据权利要求9所述的重组微生物，其特征在于，所述的失活包括：A)敲除编码谷氨酸合成相关蛋白的基因；B)突变编码谷氨酸合成相关蛋白的基因的部分碱基。 12.根据权利要求11所述的重组微生物，其特征在于，所述的失活包括使用sgRNA，所述的sgRNA包括SEQ ID NO：1、7或8任一个或两个以上所示核苷酸序列。 13.一种权利要求9-12任一所述的重组微生物的制备方法，其特征在于，所述的制备方法包括将出发菌株中的谷氨酸合成相关蛋白失活。 14.根据权利要求13所述的制备方法，其特征在于，所述的失活包括：A)敲除编码谷氨酸合成相关蛋白的基因；B)突变编码谷氨酸合成相关蛋白的基因的部分碱基。 15.根据权利要求14所述的制备方法，其特征在于，所述的失活包括使用sgRNA，所述的sgRNA包括SEQ ID NO：1、7或8任一个或两个以上所示核苷酸序列。 16.一种生产聚羟基脂肪酸酯的方法，其特征在于，所述方法包括使用培养基培养微生物；所述的微生物生产PHA，所述的培养基包括碳源、氮源和无机盐，所述的氮源包括氨基酸或氨基酸盐，所述的氨基酸为谷氨酸，所述的氨基酸盐为谷氨酸盐；所述的氨基酸的加入方式包括直接加入谷氨酸，或者，加入包含谷氨酸的毛发水解物或酪蛋白水解物中的一种或两种；所述的微生物的谷氨酸合成相关蛋白失活；所述的谷氨酸合成相关蛋白为谷氨酰胺合成酶GlnA或谷氨酰胺合成酶GlnN；所述的微生物选自盐单胞菌属( Halomonas )、恶臭假单胞菌( Pseudomonas putida )、罗氏真养杆菌( Ralstonia eutropha )、大肠杆菌( Escherichia coli )或嗜水气单胞菌( Aeromonas hydrophila )中的一种或两种以上；所述的大肠杆菌( Escherichia coli )表达外源的聚羟基脂肪酸酯合成相关蛋白。 17.根据权利要求16所述的方法，其特征在于，所述的毛发水解物包括羊毛水解物。 18.根据权利要求16所述的方法，其特征在于，所述的氨基酸盐包含氨基酸的钾盐、钠盐、钙盐、镁盐或锌盐中的一种或两种以上。 19.根据权利要求16所述的方法，其特征在于，所述培养基中氨基酸或氨基酸盐的浓度为0.01-2mol/L。 20.根据权利要求16所述的方法，其特征在于，所述的培养基中碳源的浓度为1-300g/L。 21.根据权利要求16所述的方法，其特征在于，所述的碳源选自葡萄糖、葡萄糖酸盐、葡萄糖酸酯、蔗糖、果糖、月桂酸、乙酸、丙酸、丁酸、棕榈油或油酸中的一种或两种以上。 22.根据权利要求16所述的方法，其特征在于，所述的培养基中无机盐的浓度为2.5-100g/L。 23.根据权利要求16所述的方法，其特征在于，所述的盐单胞菌属( Halomonas )包括 Halomonas bluephagenesis TD01、 Halomonas aydingkolgenesis M1或 Halomonas campaniensis LS21。