一种鉴定细胞凋亡和坏死的方法及其应用

1.一种鉴定细胞凋亡和/或坏死的方法，其特征在于，其包括：对待测细胞中脂褐素的荧光寿命进行实时检测，以荧光寿命的长短鉴定细胞凋亡和/或坏死；所述方法不以疾病的诊断或治疗为直接目的；所述方法还包括设定荧光寿命的凋亡阈值和/或坏死阈值；若待测细胞的荧光寿命≥凋亡阈值时，则判定待测细胞为凋亡细胞；若待测细胞的荧光寿命≤坏死阈值时，则判定待测细胞为坏死细胞；所述荧光寿命是指脂褐素透过单光子或双光子激发后荧光放射的衰减时间，所述脂褐素的荧光寿命的检测条件为：单光子的激发波长为500~560 nm，双光子的激发波长为970~1140nm，脂褐素的发射波长为550~800 nm；所述脂褐素的荧光寿命的相关参数包括：荧光寿命τ1、荧光寿命τ2、τ1起始强度的相对比例α1和τ2起始强度的相对比例α2中的至少一种，在鉴定细胞凋亡和/或坏死状态时，基于相关参数进行判断。 2.根据权利要求1所述的鉴定细胞凋亡和/或坏死的方法，其特征在于，所述荧光寿命是指脂褐素透过双光子激发后荧光放射的衰减时间。 3.根据权利要求1或2所述的鉴定细胞凋亡和/或坏死的方法，其特征在于，所述待测细胞选自细胞球体模型、类器官、3D肿瘤切片模型、原代组织培养以及胚胎细胞中的任意一种。 4.根据权利要求3所述的鉴定细胞凋亡和/或坏死的方法，其特征在于，所述待测细胞为3D肿瘤切片模型、原代组织培养与胚胎细胞中的任意一种。 5.根据权利要求3所述的鉴定细胞凋亡和/或坏死的方法，其特征在于，所述3D肿瘤切片与原代组织培养的厚度为200~300μm。 6.根据权利要求5所述的鉴定细胞凋亡和/或坏死的方法，其特征在于，所述3D肿瘤切片模型与原代组织培养的获取方法均为：采用凝胶对肿瘤组织或正常组织进行包裹后切片。 7.如权利要求1~6任一项所述的任一项所述的鉴定细胞凋亡和/或坏死的方法在药物的筛选或药效评价中的应用。