转录组制备关键技术

需求的背景和应用场景

随着第二代测序技术的快速发展，其在转录组测序方面的应用日益广泛，成为解决生物学问题的重要手段。转录组作为连接基因组与生物功能的纽带，其研究对于深入理解基因表达调控、疾病发生机制及药物研发等方面具有重要意义。相较于全基因组测序，转录组测序因不包含内含子及其他非编码序列，而具有更高的性价比。然而，当前的转录组建库技术仍面临诸多挑战，如高通量测序技术对样品起始量要求较高、标准RNA-Seq技术无法提供序列转录方向信息、文库构建过程繁琐且时间长等。这些问题限制了转录组测序技术在珍贵样本、低丰度样本及深入研究转录本结构和功能方面的应用。因此，迫切需要开发一种新型转录组制备关键技术，以克服现有技术的局限，推动转录组测序技术的进一步发展和应用。

要解决的关键技术问题

本技术需求旨在解决以下关键技术问题：

1. 低起始投入量兼容：开发能够兼容更低起始投入量（如100ng total RNA）的转录组建库技术，以满足珍贵样本或低丰度样本的测序需求。
2. 链特异性与非链特异性兼容：构建一种能够同时兼容链特异性与非链特异性转录组建库的技术，以提供更全面的转录组信息，包括转录本的方向和数量，以及基因的结构。
3. 操作简便化：优化文库构建流程，实现链特异与非链特异建库只需一个试剂即可区分，并将二链合成和末端修复（钝化、5'磷酸化、3'加A尾）合并为一步，以缩短建库时间，提高操作便捷性。

效果要求

该技术需求的实现将带来以下效益和竞争优势：

1. 提高测序效率：通过降低样品起始量要求和简化文库构建流程，显著提高转录组测序的效率，降低测序成本。
2. 增强数据质量：兼容链特异性与非链特异性转录组建库，提供更准确、全面的转录组信息，有助于深入解析基因表达调控机制。
3. 拓展应用范围：使转录组测序技术更适用于珍贵样本、低丰度样本及复杂生物系统的研究，推动生物医药领域的发展和创新。
4. 创新性：该技术需求提出的低起始投入量、链特异性与非链特异性兼容及操作简便化的转录组制备关键技术，将填补当前技术空白，引领转录组测序技术的新一轮革新。