外泌体作为细胞间通信的重要媒介,其表面携带的多种膜蛋白及内部包含的核酸、活性酶、细胞质底物等生物分子,为揭示细胞表型、生理状态及疾病相关机制提供了宝贵信息。尤其在癌症研究中,外泌体的异质性特征成为理解疾病进展和治疗效果的关键。然而,外泌体尺寸微小(30nm至150nm),传统光学显微镜难以捕捉,而现有的荧光染色、流式细胞术等方法又因操作复杂、光散射弱或成本高昂等局限性,难以满足高效、经济的外泌体检测需求。因此,开发一种高灵敏度、操作简便且成本可控的目视检测方法,对于推动外泌体在生物学研究和临床疾病诊断中的应用具有重要意义。
外泌体是细胞分泌的纳米级囊性小泡,在实现细胞与细胞之间通信交流起着重要作用。外泌体表面含有多种膜蛋白,并且内部含有核酸,活性酶和细胞质底物。此外外泌体还包含许多蛋白质,这些蛋白质反映了细胞的表型和生理状态,且异质性很高。外泌体的上述特征可告知许多疾病的相关生理状态和病理过程,特别是癌症,因此对细胞分泌的外泌体的敏感识别对生物学研究和临床疾病诊断具有重要意义。 由于外泌体大小范围从约30nm至150nm,在普通的光学显微镜下无法检测,现有技术通常采用荧光染色方法或者流式细胞术来分析检测,然而复杂的荧光染色以及外泌体的弱光散射,从而限制这两种方法在外泌体检测中的应用。因此针对上述存在的技术问题,现有技术对于纳米级别的外泌体,还采用透射电子显微镜可视化分析和纳米颗粒跟踪分析,然而透射电子显微镜和纳米颗粒跟踪分析仪器价格昂贵,每次测试外泌体样品的价格大约为500元,而且透射电镜测量外泌体之前,还需要对外泌体进行染色,而纳米颗粒跟踪分析方法需要复杂的分离和纯化过程。 现有技术存在前处理过程复杂、检测设备和费用昂贵以及无法区分干扰颗粒如蛋白质团聚体的技术缺陷。 (1)可用目视法实现对外泌体溶液的高灵敏度检测 (2)实现低至2.5x105个/mL外泌体溶液的高灵敏检测。
