💡这项突破是什么?
清华新闻网4月7日电 DNA缠绕组蛋白八聚体形成的核小体是染色质的基本单元。染色质重塑蛋白（chromatin remodeler）利用ATP水解的能量移动核小体，从而调节染色质结构与基因表达。染色质重塑蛋白包含四个主要家族：SWI/SNF、ISWI、CHD和INO80，它们具有多种生物学功能。其中，SWI/SNF帮助形成开放的染色质，促进基因表达；而ISWI则感知接头DNA的长度，促进等间距核小体阵列排布，推动紧密染色质结构形成。不同的染色质重塑蛋白具有高度保守的马达结构域（motor domain），是染色质重塑反应的核心。而过度的染色质重塑反应需被抑制，从而避免破坏染色质结构。染色质重塑马达如何克服核小体中组蛋白与DNA的相互作用，滑移核小体的机理并不完全清楚。
4月4日，清华大学生命学院教授陈柱成在《科学》（Science）杂志在线发表题为“活跃ATP水解过程中ISWI染色质重塑的结构解析”（Structuralinsights intochromatin remodeling by ISWI during active ATP hydrolysis）的研究论文。过往的结构研究可能由于使用不能被水解的核苷酸底物，只捕捉到三种染色质重塑状态（ATP、ADP和Apo）。这个最新的研究使用ATP维持DNA滑移，让马达蛋白经历重塑循环中所有可能的构象。研究人员设计了不同浓度ATP实验条件，富集不同状态下的构象，并通过冷冻电子显微镜技术，首次从ATP水解过程中解析出ATP、ADP、ADP*、ADP⁺、ADP*⁺、Apo、Apo*、ADPS和ADPB等九种ISWI结合核小体的动态结构（分辨率2.3-3.0 Å）。这九种结构共同组成了迄今最完整的染色质重塑循环模型，为解释染色质重塑中的DNA滑移和刹车机制奠定了基础。
研究人员发现ISWI马达蛋白在核小体内部（SHL2）引起1bp DNA隆起（图1）。这个全新构像被命名为ADP*，有别于经典ADP状态下的1/2bp DNA形变。ADP*构象中，DNA双链同时从入口端向核小体内部滑移，导致1bp DNA隆起过渡性地储存在SHL2处，并打破DNA-组蛋白的局部相互作用。这时，ATP水解的化学能变转换成DNA形变的势能。这一现象与两种被广泛关注的染色质重塑机制存在冲突。这既不同于“扭曲传播”（twist diffusion）模型中DNA-组蛋白相互作用保持完整的情况，也有别于“环传播”（loop propagation）模型中多个相邻位点相互作用同时被破坏的特征。ADP*状态的发现找到了染色质重塑循环中缺失的关键拼图，提示一种新的DNA形变传播模式。
图1.存储1bp DNA隆起的ADP*状态结构。（A）ADP*状态下，DNA隆起的电镜密度图。（B）局部DNA-组蛋白相互作用分析。ATP状态，灰色；ADP*状态，彩色。在ADP*状态下，DNA与组蛋白局部相互作用被破坏。（C）相对于ATP状态，ADP*状态的DNA磷酸骨架位移距离热图。ADP*状态下，两股DNA链从入口端向核小体内部移动（箭头方向），1bp DNA形变储存在SHL2位置。（D）ATP状态（灰色）与ADP*状态（彩色）位于SHL2处的DNA结构对比
研究还发现了ISWI的多个特异调控构象：ADP⁺、ADP*⁺、ADPS以及ADPB。ADP⁺和ADP*⁺具有正向调控元件：RYA（arginine-tyrosine anchor）和PosC（图 2A-C）。ADP⁺和ADP*⁺构象常见于核小体接头DNA较短一侧，可能起到弥补DNA结合结构域（DBD）锚定不足的作用，从而稳定马达对核小体的结合，促进染色质重塑活性。相反，在ADPB状态下，正向调控元件作用消失，而新生成的Brake元件通过变构作用，导致马达蛋白异常开放，从而落入失活状态（图2D-E）。据此，研究人员提出了染色质重塑的刹车机制，阐明了ISWI家族特异的接头DNA感知机制。
图2.ISWI调控状态的结构。（A）ISWI结构域示意图。（B）ADP+的PosC（深蓝）结构。（C）ADP+的RYA结构。上图展示组蛋白表面电势。（D）ADPB的结构，Brake（橙色）。
