G20工程龙头企业培育—脂质体创新制剂品种研发

20230109

制造业

北京市科学技术委员会;中关村科技园区管理委员会

脂质体制剂技术可有效降低药物毒性、实现缓释，同时也是基因治疗药物的理想载体。本课题以脂质体制剂技术为基础，研究了治疗深部真菌感染药物两性霉素B脂质体和治疗类风湿性关节炎的基因治疗药物CKIP-1小干扰RNA（siRNA）脂质体，以满足临床需求。 两性霉素B脂质体研究的主要目的是研究单次输注给予受试制剂注射用两性霉素B脂质体与参比制剂AmBisome??在健康受试者体内的药代动力学特征，并评价两种制剂的生物等效性。本试验采用单中心、开放、随机、单剂量、双处理、平行设计。受试者为健康人群，以2mg/kg剂量进行静脉滴注。采集给药后48小时内血样。用已确证的液相色谱-串联质谱法测定血浆中包裹态两性霉素B和非包裹态两性霉素B浓度。本研究结果表明包裹态两性霉素B的Cmax、AUC0-t及 AUC0-∞几何均值比的90%置信区间分别为99.22%120.19%、80.36%105.56%、80.81%105.64%，均在80.00125.00%等效区间内，表明在中国健康成年受试者中，单次使用受试制剂注射用两性霉素B脂质体与参比制剂AmBisome??生物等效成立。此外，还对两性霉素B脂质体生产工艺进行了放大研究和工艺验证，获得了稳定的生产工艺，生产出3批合格报产产品，获得检验合格报告。 本研究还评价了1类新药CKIP-1 siRNA脂质体的成药性。获得的候选CKIP-1 siRNA序列体外可显著降低CKIP-1 mRNA和蛋白水平，并具有显著抗炎和促进骨形成作用；确定甲氧基和锁合修饰两种化学修饰方法，可提高siRNA的稳定性和靶向性。另外，以脂质体粒径、电位、PDI、稳定性、细胞毒性、转染效率等为指标，对脂质体处方中阳离子脂材用量、中性脂材用量、DSPE-PEG2000用量及N/P比分别进行了优化，确定了最优处方；对工艺进行优化，最终确定重复性好的工艺路线，并得到验证，初步获得载CKIP-1 siRNA阳离子脂质体。体内药效研究显示，在小鼠RA模型中，siRNA可显著降低CIKP-1 mRNA表达，不降低动物体重；此外，可显著降低注射关节肿胀评分、抑制TNF-α、IL-6、IL-17的mRNA表达。载siRNA 阳离子脂质体静脉注射和关节腔注射均能检测到siRNA，局部给药吸收入血可提高siRNA对外周血单核细胞的抗炎作用，因此确定了给药途径为关节腔局部给药。毒性研究结果显示，在高于药效3倍剂量的siRNA急毒研究中，未见任何异常。综上，本品作为关节腔局部注射治疗类风湿关节炎，安全、有效，具有继续开发的价值。