Endo-Angio及IL-15双基因溶瘤病毒工程化MSCs对脑胶质瘤疗效研究

20220124

卫生和社会工作

科技成果现处于实验室研究的阶段，实验室获得Endo-Angio-IL-15双基因溶瘤病毒以及携带Endo-Angio及IL15双基因溶瘤病毒的MSCs。具体的转化基础如下： 1.成功构建Endo-Angio-IL-15双基因溶瘤病毒载体并包装获得高滴度高纯度Endo-Angio-IL-15双基因溶瘤病毒。 技术指标如下：①包装获得高滴度Endo-Angio-IL-15双基因的溶瘤病毒，病毒滴度达到 2E10 PFU/ml。③对胶质瘤细胞有特异性杀伤作用：实验证明携带Endo-Angio-IL-15双基因的溶瘤病毒仅对胶质瘤细胞有特异性杀伤作用，而对非胶质瘤细胞无杀伤作用。④皮下及颅内原位模型中对胶质瘤有显著疗效：皮下及颅内原位模型均证明携带Endo-Angio-IL-15双基因的溶瘤病毒对胶质瘤有显著疗效，可显著改善空载溶瘤病毒的疗效。 2.获得携带Endo-Angio及IL15双基因溶瘤病毒的MSCs 技术指标：①MSCs可携带并胞外分泌Endo-Angio及IL15双基因溶瘤病毒。②MSCs可携带Endo-Angio及IL15双基因溶瘤病毒并在肿瘤组织内迁移，从而最大化增强病毒在肿瘤组织内的扩散，增强病毒疗效的。③体内研究证明携带Endo-Angio及IL15双基因溶瘤病毒的MSCs对胶质瘤有显著疗效：颅内原位模型证明携带Endo-Angio-IL-15双基因溶瘤病毒的MSCs对胶质瘤有显著疗效。

项目研究证明Endo-Angio及IL15双基因溶瘤病毒和携带Endo-Angio及IL15双基因溶瘤病毒MSCs对胶质瘤有显著疗效，并且携带Endo-Angio及IL15双基因溶瘤病毒的MSCs具有携带病毒在组织内迁移的能力，从而可大大增强原因溶瘤病毒的抗肿瘤作用。说明Endo-Angio及IL15双基因溶瘤病毒和携带Endo-Angio及IL15双基因溶瘤病毒MSCs均具有胶质瘤临床治疗应用前景。 进一步针对Endo-Angio及IL15双基因溶瘤病毒和携带Endo-Angio及IL15双基因溶瘤病毒MSCs进一步开展转化研究及相应的转化合作如下：Endo-Angio及IL15双基因溶瘤病毒和携带Endo-Angio及IL15双基因溶瘤病毒MSCs对高级别胶质瘤患者及复发性胶质瘤患者临床试验需求。具体的合作要求如下：1）开展临床研究所需资金100-200万元，包括高滴度病毒的大批量的包装及质控；患者的临床病毒治疗各项所需费用。2）需招募高级别胶质瘤患者或复发型胶质瘤患者，对患者进行鉴别甄选入组；3）开展临床胶质瘤溶瘤病毒定位注射治疗所需的手术场地及设备；4）开展临床胶质瘤溶瘤病毒定位注射所需的临床医务人员。5）开展临床胶质瘤溶瘤病毒针对高级别胶质瘤患者或复发型胶质瘤患者定位注射治疗所需的紧急救助设备。

可国（境）内外转让

我们通过体外实验及体内皮下及颅内原位胶质瘤模型均证明了Endo-Angio及IL-15双基因溶瘤病毒及携带Endo-Angio及IL-15双基因溶瘤病毒的MSCs对胶质瘤治疗的显著疗效；并且Endo-Angio及IL-15双基因溶瘤病毒具有体内血管抑制和免疫激活的作用。本课题为Endo-Angio-IL-15双基因在肿瘤基因治疗中的“候选基因”的有效性以及Endo-Angio及IL-15双基因溶瘤病毒的应用和推广打下了坚实的实验基础。具体的推广价值和效益如下：1）Endo-Angio及IL-15双基因作为“候选基因”在肿瘤治疗中的应用。Endo-Angio及IL-15双基因可以抑制肿瘤微环境中的血管生成以及激活肿瘤免疫微环境，在肿瘤基因治疗中发挥作用。2）Endo-Angio及IL-15双基因溶瘤病毒可以在挥溶瘤作用的同时，抑制肿瘤血管生成并激活肿瘤微环境，因此可以在肿瘤临床治疗中发挥作用；3）携带Endo-Angio及IL-15双基因溶瘤病毒的MSCs可以保护并携带溶瘤病毒在肿瘤组织内侵袭转移，从而更好地发挥溶瘤病毒的疗效。Endo-Angio及IL-15双基因，Endo-Angio及IL-15双基因溶瘤病毒以及携带Endo-Angio及IL-15双基因溶瘤病毒的MSCs在胶质瘤临床治疗中均具有一定的推广和应用价值及潜在的经济价值和社会效益。如果转化成果，可改善胶质瘤的治疗效果，带来良好的经济社会效益。

北京市自然科学基金面上项目

北京市科学技术委员会;中关村科技园区管理委员会

本课题在原有研究的基础上，构建携带Endo-Angio-IL-15双基因的溶瘤病毒，以期在发挥溶瘤作用的同时，抑制胶质瘤新生血管的形成，并改善肿瘤微环境，增强肿瘤免疫；进一步以间充质干细胞为载体保护并携带溶瘤病毒到胶质瘤特定部位，增加溶瘤病毒组织扩散能力，从而高效杀伤胶质瘤细胞。本项目按照研究计划进行研究，主要取得了以下研究成果：1）成功构建携带Endo-Angio-IL-15双基因的溶瘤病毒载体并包装获得Endo-Angio-IL-15双基因的溶瘤病毒。2）通过原代培养成功获得多株胶质瘤干细胞和胶质瘤细胞并完成细胞鉴定。3）Endo-Angio及IL-15双基因溶瘤病毒对胶质瘤细胞具有良好的特异性及治疗疗效。4) Endo-Angio及IL-15双基因溶瘤病毒具有抑制组织内血管生成及激活组织内免疫反应的作用。5) 携带Endo-Angio及IL15双基因溶瘤病毒的MSCs对胶质瘤具有良好的治疗疗效并且具有携带病毒在组织内迁移的能力。 本研究的科学意义及原理在于：1）获得的Endo-Angio-IL-15双基因的溶瘤病毒具有胶质瘤细胞溶瘤作用，抑制肿瘤组织血管生成及激活肿瘤免疫的三重作用，发挥溶瘤作用的同时改善肿瘤微环境，从而增强溶瘤病毒的作用。2）通过MSCs保护Endo-Angio-IL-15双基因溶瘤病毒并可在肿瘤组织内迁移，从而最大化增强病毒在肿瘤组织内的扩散，增强病毒疗效。 我们通过体外实验及体内皮下及颅内原位胶质瘤模型均证明了Endo-Angio及IL-15双基因溶瘤病毒及携带Endo-Angio及IL-15双基因溶瘤病毒的MSCs对胶质瘤具有显著的治疗疗效；并且Endo-Angio及IL-15双基因溶瘤病毒具有体内血管抑制和免疫激活的作用。本课题为Endo-Angio-IL-15双基因在肿瘤基因治疗中的“候选基因”的有效性以及Endo-Angio及IL-15双基因溶瘤病毒的应用和推广打下了坚实的实验基础。Endo-Angio-IL-15双基因，Endo-Angio及IL-15双基因溶瘤病毒以及携带Endo-Angio及IL15双基因溶瘤病毒的MSCs在胶质瘤治疗中均具有一定的推广及应用价值及潜在的经济价值和社会效益。