TCR－T细胞疗法在EB病毒相关恶性肿瘤治疗中的应用

20230106

科学研究和技术服务业

在EBV病毒感染过程中，免疫系统功能障碍是导致多种疾病治疗失败的根本原因，目前随着免疫治疗在肿瘤等多种疾病中的应用和探索，增强或者平衡人体免疫功能已经成为攻克多种疾病的重要手段。但靶向EBV相关疾病（鼻咽癌、胃癌、PTLD及淋巴瘤），目前尚无有效的免疫治疗方法，因此亟待开发一种作用机制明确，临床疗效明显，同时具有重大临床转化前景的靶向EBV的免疫治疗手段。 本项目从EBV相关的上皮肿瘤-鼻咽癌入手，构建覆盖大多数人群的HLA分型的质粒库和蛋白表达库，构建多种EBV抗原相关的四聚体库，通过以四聚体为探针，健康人外周血为筛选库，最终构建EBV相关抗原的TCR文库，最终构建靶向EBV的特异性TCR-T细胞，并在体外细胞和动物水平系统地验证EBV-TCR-T细胞的靶向识别和杀伤功能，最终将EBV-TCR-T细胞产品推入临床研究阶段，进一步阐明EBV-TCR-T细胞在鼻咽癌治疗中的安全性和有效性，未来扩展至其他EBV相关疾病的治疗中。本研究是国内外领先的细胞免疫疗法，解决了肿瘤特异性抗原鉴定及副作用的问题，同时可有效清除或极大程度地减少EBV病毒感染或潜伏的癌变细胞。 本项目中EBV-TCR-T细胞产品的研究进展现处于国内外领先水平，目前国内外尚无相关品种进入临床申报阶段，本项目的研究目标是通过EBV-TCR-T细胞疗法在鼻咽癌中的作用研究，从1-3种主流HLA-A配型的目标适应症人群，逐渐扩展到更广泛的HLA人群，更广泛的EBV相关的肿瘤。 本项目中的EBV-TCR-T细胞疗法拟在二线治疗失败的复发和难治性鼻咽癌中探索期安全性和疗效。同时，自体EBV-TCR-T细胞回输策略，理论上会呈现更加特异性的EB病毒高表达的鼻咽癌细胞的杀伤作用，同时对正常组织脏器的无交叉识别反应。相比于CAR-T疗法的临床研究，从原理和已有临床实践上分析，本研究的安全性更佳。在临床试验中，细胞输注前进行非清髓性预处理，能改变机体内的免疫状态，清除抑制性免疫细胞，从而更有利于回输的T细胞发挥功能，预期受试者可获得更好的抗肿瘤疗效。 本项目研究结果表明，EBV-TCR-T细胞可有效抑制EBV抗原高表达的靶细胞的生长，因此，进一步探索和开发EBV抗原特异性的T细胞疗法在EBV相关鼻咽癌中的潜在的临床应用价值和前景具有重要临床意义。

华夏英泰专注于以TCR-T为代表的针对多种疾病的细胞免疫治疗产品的开发及商业化，于2018年3月由著名免疫学家林欣教授领衔创立。公司拥有两大独有技术平台STAR-T和TCR-T，以及成熟的工艺开发及质量控制的产业化平台。已与国内多家一流医院合作启动了多项备案的“First-in-Human”临床研究，取得积极的临床安全性与有效性数据，多次在国际顶尖学术会议和期刊发布。首款双靶点STAR-T候选产品于2022年9月获得IND默示许可。公司在北京昌平中关村生命科学园已落成近5000平米高标准的研发及GMP级细胞制备中心，建立了完善的工艺开发和质量控制体系。公司成立至今已完成了近5亿元的股权融资。目前公司团队规模百人，其中研发人员占比超70%。公司获得了国家高新技术企业、中关村高新企业、中关村金种子企业、中关村前沿技术企业、北京市“专精特新”中小企业等称号。 华夏英泰开发的创新型T细胞治疗技术平台及产品，市场规模巨大且可能具有显著的价格优势。公司拥有所开发产品的底层专利，亦具有极大商业价值。产品可与大型药企进行License out/Partnership等合作发挥巨大的商业价值。 本项木研发产品在安全性和有效性初步确定的情况下，可以通过扩大适应症广泛用于EBV相关的恶性肿瘤及疾病。TCR-T技术平台的建立，可以用于更广泛产品的研发，包括靶向病毒如HPV、HBV、CMV相关治疗产品的开发，用于多种实体肿瘤的肿瘤和预防。同时也可借此平台开发针对肿瘤新抗原的免疫细胞疗法，最终实现肿瘤精准治疗和个体化的治疗目的。

可国（境）内外转让

（1）国内外行业飞速发展，行业平台逐渐成熟，将大力推进产品研发进程。 目前，创新型免疫细胞疗法如CAR-T和TCR-T细胞已经成为国内外生物制药创新领域研发的重点方向和热点领域。目前国内CAR-T细胞疗法研发企业已有近百家，已有超30项产品进行IND申报，伴随CAR-T产品在美国和欧洲获批上市，相关CAR-T产品将陆续进入国内，同时国内领先的细胞产品和技术也将走向国际化，我国细胞免疫治疗产业也正在飞速发展。 （2）EBV相关适应症广泛，恶性程度高，临床急需新型治疗手段。 EBV-TCR-T疗法作为一种新型的细胞疗法，目标适应症患者为EBV相关的上皮肿瘤和血液肿瘤，潜在适应症包括鼻咽癌、胃癌和多种淋巴瘤等。目前鼻咽癌全球每年新发病例近9万，胃癌新发病近120万，其中EBV相关的胃癌占比约8.2%，近10万人。全球每年淋巴瘤患者新发病例也近百万，其中EBV相关约占10%左右。中国由于人口基数大，多种肿瘤发病率和死亡率均居于世界首位，鼻咽癌和胃癌更是中国占比较多的肿瘤类型。因此，不论是恶性的淋巴瘤，还是难治的上皮肿瘤，尤其是针对晚期复发难治性的类型，均亟需新型的治疗手段。 （3）覆盖80%人群HLA四聚体库的建立，TCR-T的临床应用前景更广泛。 本项目早期主要集中于3种主流HLA配型开展相关研究，后续随着研究的进展和完善，将把HLA配型扩展到覆盖近80%的人群。同时相关HLA质粒库的构建，不仅可用于EBV抗原相关疾病TCR-T疗法的开发，也可用于其他病毒抗原如CMV、HBV、HPV等相关TCR-T疗法的开发。同时伴随肿瘤新抗原额研究和进展，个体化治疗将成为未来临床研究和应用的趋势。肿瘤新抗原的TCR-T疗法也将成为未来的热点研究方向。本项目中储备的覆盖全球80%人群的HLA表达库，未来将具有巨大的研发应用空间，是多种新技术和新疗法开发的必备技术需求和积累。

北京市科学技术委员会;中关村科技园区管理委员会

本项目以鼻咽癌等EBV相关肿瘤患者为目标人群，以高效清除EBV感染肿瘤细胞，促进患者免疫能力恢复为目标，构建和开发有效的EBV抗原特异性的TCR-T细胞疗法（EBV TCR-T细胞库），为实现临床治疗应用提供了坚实的研究基础。结题时本项目目标均以完成。具体如下：

1. 已完成针对EBV抗原肽的覆盖80%我国人群HLA型的15种以上Tetramer探针库的构建，制备3种高丰富HLA-A2402、HLA-A0201、HLA-A*1101配型的15种以上EBV抗原肽的四聚体库。
2. 已建立3种以上高丰度HLA-A配型针对EBV抗原肽的30种以上的TCR质粒库。
3. 已构建一套完善的TCR-T细胞水平和动物模型体内功能评价体系，包括细胞识别、细胞因子分泌、靶细胞杀伤以及体内动物模型的建立，以确定TCR-T的体内外功能的科学评价。
4. 已建立标准化的TCR表达慢病毒制备流程和质控标准，包括细菌、真菌、支原体和内毒素等细胞外源因子监测；已建立完善和标准化的TCR-T细胞制备和质控流程，包括细胞活率和TCR阳性表达水平、细胞因子分泌等质控指标，确保临床级细胞的安全性和质量可控性。
5. 已开展1项EBV-TCR-T细胞疗法的临床探索性研究，获得EBV-TCR-T细胞疗法在EBV阳性的鼻咽癌（二线治疗失败的）等疾病中的安全性和有效性数据。
6. 申请发明专利6项，1项中国发明专利获授权。